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植物油中黄曲霉毒素B1含量的免疫亲和柱法_标准集团(香港)有限公司

更新时间:2023-01-05 00:00  关键词:植物油中黄曲霉毒素B1含量的免疫亲和柱法_标准集团(香港)有限公司  浏览次数:

植物油中黄曲霉毒素B1含量的免疫亲和柱法


黄曲霉毒素B1的介绍

黄曲霉毒素B1(Aflatoxin B1简写为AFB1)是二氢呋喃氧杂萘邻

的衍生物,含有一个双呋喃环和一个氧杂萘邻tong(香dou素),其污染的食物主要是花生、玉米、稻谷、小麦、花生油等粮油食品。黄曲霉毒素B1是目前已知的化学物质中致癌性强的一种,对肝脏的损害极其严重。

黄曲霉毒素B1的安全量

国家食品安全标准《GB 2761-2017》规定植物油脂(花生油、玉米油除外)中黄曲霉毒素B1的允许量不得超过10 ug/kg。花生油、玉米油中黄曲霉毒素B1的允许量不得超过20 ug/kg。

冠一生物开发使用免疫亲和柱法检测植物油中黄曲霉毒素B1的含量,平均回收率为92.9%,RSD 4.1%,为客户提供关于植物油中黄曲霉毒素B1检测有效的解决方案。

实验目的

本研究利用免疫亲和柱法作为样品的前处理方法,HPLC法作为分析方法,检测植物油中黄曲霉毒素B1的含量。该方法可简化样品的前处理过程,节省有机溶剂的使用,操作简便。

实验目标物

黄曲霉毒素B1(CAS:1162-65-8)。

应用范围

本方法适用于植物油中黄曲霉毒素B1检测的HPLC检测及确证。

参考标准

GB 5009.22-2016食品安全国家标准 食品中黄曲霉毒素B族和G族的测定》。

实验材料

黄曲霉毒素B1免疫亲和柱

实验方法
1.样品提取


准确称取植物油试样5.0 g试样(精确至0.01 g)于50 mL离心管中,加入20 mL乙腈-水(84+16)溶液,涡旋混合1 min,超声提取20 min,在5000 r/min离心10 min,提取上清液4 mL于另一个离心管中,加入21 mL水,混匀待净化。

2.免疫亲和柱净化


(1)上样:将12 mL注射器连接于免疫亲和柱上端,取待净化液样品液以1-2滴/秒的速度通过免疫亲和柱,弃掉流出的液体。

(2)淋洗和洗脱:用20 mL水淋洗柱子,分两次淋洗,弃掉流出的液体;抽干小柱;加入2×1 mL甲醇缓慢洗脱亲和柱,流速约为2-3滴/秒;50 ℃下氮吹至近干,待衍生。

3.衍生化反应


(1)加入100 uL三氟yi酸,200 uL正己烷于待衍生样品中,于40 ℃水浴避光衍生15 min。

(2)重新溶解:50 ℃下氮吹至近干,加入1mL乙腈-水(15+85)溶液溶解,0.22 um滤膜过滤,供HPLC分析。

4.HPLC条件

设备Waters Alliance 2695

色谱柱InerSustain®-C18 (4.6 mmX250 mm, 5 μm)

检测器Waters 2475荧光检测器

检测波长:激发波长:365 nm 发射波长:435 nm

流动相A:乙腈   B:水

洗脱方式:梯度洗脱

1 流动相梯度洗脱程序

流速:1 mL/min

进样体积:10 uL

实验结果

1、1.0 ug/kg 猪肉基质中黄曲霉毒素B1的添加回收结果

1  1.0 ug/kg猪肉基质中黄曲霉毒素B1的添加回收结果

2、添加水平为1.0 ug/kg猪肉基质中黄曲霉毒素B1检测的液相色谱图

1 添加水平为1.0 ug/kg猪肉基质中黄曲霉毒素B1检测色谱图


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